Criopreservación de semen de Bagre blanco (Sorubim cuspicaudus) condimetilacetamida como crioprotector

Resumen

Para evaluar la crioconservación de semen de bagre blanco utilizando dimetilacetamida (DMA) fueron preparadassoluciones crioprotectoras con DMA a tres porcentajes de inclusión (8, 10 y 12%), glucosa 6% y leche en polvodescremada 5%. La osmolaridad de las soluciones fue medida con osmómetro (Precision System, Osmomette III,Usa). El semen fue diluido a razón de 1:4 (semen:solución) y congelado con vapores de nitrógeno en dry shipper(MVE 4/2v, Usa). La concentración, movilidad total, velocidad y progresividad del semen crioconservado y fresco(control) fue evaluada con el programa asistido por computador Sperm Class Analyzer SCA® (Microptic, España). Lafertilidad y eclosión se evaluaron fertilizando un gramo de ovocitos con semen crioconservado y fresco; mantenidosen incubadoras cilindro-cónicas de 2L. La osmolaridad de las soluciones crioprotectoras fue 1233,3 ± 23,1 mOsm/kg(DMA 8%), 1530 ± 0,0 mOsm/kg (DMA 10%) y 1627,7± 5,8 mOsm/kg (DMA 12%). Semen fresco mostró la mejormovilidad total (99,6±0,4%), porcentaje de espermatozoides rápidos (34,7 ± 12,2%) y progresividad (48,2 ± 12,8%),valores estadísticamente diferentes a los obtenidos con semen crioconservado (p<0,05). La mayor movilidad totalse registró con semen crioconservado con DMA 8% (55,4 ± 13,6%) (p<0,05); así como los mayores porcentajes deespermatozoides rápidos (1,5-2,5%), progresividad total (1,9-10,1%) y velocidad curvilínea (29,5-35,9 μm/s) sinpresentar diferencia significativa con los diferentes porcentajes de DMA evaluados (p>0,05). La fertilización consemen fresco (19,5 ± 4,4%) y semen crioconservado con DMA 8% (17,8 ± 8,3%) no presentó diferencia significativa(p>0,05). La solución crioprotectora compuesta por DMA 8%, glucosa 6% y leche en polvo descremada 5% es unaalternativa viable para la crioconservación de semen de bagre blanco.

Cryopreservation of Trans-Andean shovelnose catfish (Sorubim cuspicaudus) semen using dimethylacetamide

Cryoprotectant solutions of dimethylacetamide (DMA) were used at three inclusion levels (8, 10, and 12%) toevaluate cryopreservation of Trans-Andean shovelnose catfish semen. The solutions also included 6% glucose and 5%skimmed milk powder. Osmolarity of the solutions was measured with an osmometer (Precision System, OsmometteIII, USA). Semen was diluted at a 1:4 ratio (semen:solution) and frozen in nitrogen vapors using a dry shipper (MVE4/2V, USA). Concentration, mobility, speed, and progressivity of cryopreserved and fresh semen (control) wereassessed with the SCA® Sperm Class Analyzer (Microptic, Spain) computer-assisted program. Fertility and hatchingwere evaluated fertilizing one gram of oocytes with cryopreserved and fresh semen, which was then kept in 2Lcylinder-conical incubators. The osmolarity of cryoprotective solutions was 1233.3 ± 23.1 mOsm/Kg (8%DMA),1530 ± 0.0 mOsm/Kg (10% DMA), and 1627.7 ± 5.8 mOsm/Kg (12% DMA). Fresh semen showed better totalmobility (99.6 ± 0.4%), percentage of rapid sperm (34.7 ± 12.2%), and progressivity (48.2 ± 12.8%), comparedwith cryopreserved semen (p<0.05). Cryopreserved semen with 8% DMA had the highest total mobility (55.4 ± 13.6%) (p<0.05) as well as the highest percentage of rapid sperm (1.5-2.5%), total progressivity (1.9 to 10.1%), andcurvilinear velocity (29,5-35,9 μm/s) without significant difference with the evaluated DMA percentages (p> 0.05).Fertilization with fresh semen (19.5 ± 4.4%) and 8% DMA cryopreserved semen (17.8 ± 8.3%) were not different(p>0.05). A cryoprotective solution composed of 8% DMA, 6% glucose, and 5% skimmed milk powder is a viablealternative to cryopreserve Trans-Andean shovelnose catfish semen.

Keywords: Cryopreservation, dimethylacetamide, milt, pimelodidae, reproduction, semen.

Criopreservação de sêmen de Bagre branco (Sorubim cuspicaudus) comdimetilacetamida como crioprotetor

Para avaliar a criopreservação de sêmen de bagre branco utilizando dimetilacetamida (DMA) foram preparadassoluções crioprotetoras com DMA a três porcentagens de inclusão (8, 10 e 12%), glucose 6%e leite em pó desnatada5%. A osmolaridade das soluções foi medida com osmômetro (Precision System, Osmomette III, USA). O sêmen foidiluído em razão de 1:4 (sêmen: diluição) e congelado com vapores de nitrogênio em dry shipper (MVE 4/2v, USA). Aconcentração, mobilidade total, velocidade e progressividade do sêmen criopreservado e fresco (controle) foi avaliadocom o programa assistido por computador Sperm Class Analyzer SCA® (Microptic, Espanha). A fertilidade e eclosãoavaliaram-se fertilizando uma grama de ovócitos com sêmen criopreservado e fresco, mantidos em incubadorascilindro-cônicas de 2L. A osmolaridade das soluções crioprotetoras foi de 1233,3 ± 23,1 mOsm/kg (DMA 8%); 1530± 0,0 mOsm/kg (DMA 10%) e 1627,7 ± 5,8 mOsm/kg (DMA 12%). O sêmen fresco mostrou a melhor mobilidadetotal (99,6 ± 0,4%), a porcentagem de espermatozoides rápidos (34,7 ± 12,2%) e de progressividade (48,2 ± 12,8%),esses valores com sêmen fresco são estatisticamente diferentes aos obtidos com sêmen criopreservado (p<0,05). Amaior mobilidade total registrou-se com sêmen criopreservado com DMA 8% (55,4 ± 13,6%) (p<0,05); assim comoas maiores porcentagens de espermatozoides rápidos (1,5-2,5%), progressividade total (1,9-10,1%) e velocidadecurvilínea (29,5-35,9 μm/s) sem apresentar diferença significativa com as diferentes porcentagens de DMA avaliados(p>0,05). A fertilização com sêmen fresco (19,5 ± 4,4%) e sêmen criopreservado com DMA 8% (17,8 ± 8,3%) nãoapresentou diferença significativa (p>0,05). A solução crioprotetora composta por DMA 8%, glucose 6% e leite empó desnatada 5% é uma alternativa viável para a criopreservação de sêmen de bagre branco.

Palavras chave:Criopreservação, dimetilacetamida, pimelodidae, reprodução, sêmen.