Evaluación de la capacidad de invasión de serovariedades de Salmonella enterica a células Hep-2

Resumen

La especificidad de l1ospedero de Salmonella enterica sugiere diferencias en los pasos iniciales de patogénesis y en la expresión de genes de invasión. En este estudio, se evaluaron las diferentes capacidades de invasión a células Hep~2 de Salmonella serovariedades typl1imurium, S. cl1oleraesuis, S. enteritidis, S. typhi y S. pullorum. Se buscó también la presencia del gen hilA (locus de l1iperinvasividad A. regulador de la isla de patogenicidad 1) por reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Los ensayos de invasión se realizaron mediante la técnica de protección con gentamicina. Las células Hep~ 2 fueron inoculadas con aislamientos de Salmonella obtenidos de cultivos de diferente osmolaridad en caldo Luria Berthani. El porcentaje de recuperación de Salmonella intracelular se determinó por cultivos de diluciones por lisis de las células Hep~2 y del sobrenadante. Todos los aislamientos presentaron el gen hilA; S. typl1imurium presentó el porcentaje más alto de invasión, respecto a las otras serovariedades. S. enteritidis, S. cl10leraesuis y S. typl1i presentaron un porcentaje de invasión similar y S. pullorum presentó el porcentaje más bajo. SUMMARY Host specificity of Salmonella enterica suggests differences in the early steps of pathogenesis and different express ion of invasive genes. In this study, invasion to Hep~2 cells was evaluated to detect different capacity of invasion among Salmonella serovars Typhimurium, S. Choleraesuis, S. Enteritidis, S. Typhi and S. Pullorum. Also, the presence of hilA gene (hyperinvasive locus A, a regulator gene of the pathogenicity island 1) was investigated by polymerase chain reaction (PCR) in these isolates. Invasion was performed using the gentamicin protection assay. The Hep~ 2 cell cultures were inoculated with Salmonella isolates obtained from different osmolarity ofLuria Berthani broth. The percentage of recovering of intracellular Salmonella was deterrnined through dilution cultures of the intracellular bacteria recovered. The percentage of recover of intracellular Salmonella was compared among serovars to determine its invasive capacity to Hep~2 cells. All isolates showed the hilA gene. The serotype Typhimurium has the higher percentage of invasion respect to other serotypes. S. Enteritidis, Choleraesuis and Typhi have similar invasion levels and S. Pullorum has low invasion index. These findings show differences in the initial step for invasion of Salmonella isolates than proceed in different kind of hosts.